Re: [問題] DNA電泳膠體純化
在操作的過程中造成的污染不可能和你 PCR 產物一樣多吧！
應該是 PCR product 本身的問題
至於一開始沒看到可能是 loading 的量太多，兩條 band 就黏在一塊兒了吧！
如果是要做 gel extraction 的
建議用 low voltage 來分離
(我的 power supply 只能調 50V/100V，所以我只能選50
如果你的能調，可以用更低一些)
然後要用適合你 PCR size 的 gel percentage 喔！
如果還是分不好，就先做 TA cloning 吧！
※ 引述《shamtg (shan)》之銘言：
: 請問各位有經驗的人士們
: 進行 cDNA 電泳膠體純化後
: ?什麼反而會有兩條 band
: 我的步驟如下
: 1.病毒中先萃取出的 RNA
: 2.進行 RT-PCR
: 3.進行跑膠
: 結果我跑出來的膠有一條 major band 和 一條 primer dimer band
: 所以我又進行了以下 (因為要送定序,所以我不希望有 primer dimer band)
: 1.跑電泳膠
: 2.將電泳
: 3.膠進行照膠
: 4.將 major band 進行切膠
: 5.將切下來的 major band 進行 純化
: 6.進行跑膠
: 跑出來的結果發現 在 major band 上方約 0.1 cm 竟然還有一條 band
: 這是發生什麼事了呢?
: 是切膠的過程出了問題
: or
: 膠體純化出了問題
: 拜託各位了 !!
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