Re: [問題] Lipofectamine 2000
※ 引述《aggaci (學鋼琴，左手怎麼那麼笨)》之銘言：
: ※ 引述《ad1980 (Apoptosis)》之銘言：
: : 不好意思，因為一樣是關於Lipofectamine 2000的問題，
: : 所以直接用原來的標題。
: : 它給的protocol上面寫說，
: : for plasmid transfection, high cell density (90-95%) to minimize cell death.
: : 可是在RNA transfection 那邊，
: : 寫說tranfection condition 的cell denisty是30-50% confluent。
: : 為什麼一樣都是Lipofectamine 2000，
: : RNA transfection 的時候只要30-50% confluent 就夠了，
: : 可是plasmid 卻要90-95%才能 minimize cell death？
: : 我試過大概70%以下就會死很多細胞，
: : 如果是Lipofectamine的原因，那RNA transfection的時候，
: : 細胞不是死光光了嘛？
: : 為什麼RNA transfection就不用90-95% confluency
: : 來 minimize cell death 呢？
: 我建議 如果要做RNAi transfection，建議用它新出的Lipofectamine RNAiMAX
: 因為第一:毒性低，第二:RNAi不需太多效果就很好
: (我knockdown efficiency可達90%以上)
: 其實細胞多的話，transfection效果的確比較差！
: p.s 我其實很不建議DNA transfection用lipofectamine 2000，毒性太強了！
: Mirus TL1、transfast都比2000好，毒性低，效果不會比較差，也不會比較貴
其實有時候要看細胞的特性 再來決定cell confulent或是要用哪一家的reagent
像HeLa S3用lipo2000效果絕對比LT1好 至少有9成 送RNA也沒問題 因為HeLa細胞
比較不容易疊 很好送 所以我覺得細胞特性 站蠻大因素的 當然medium也有差
比如說serum好壞就真的差很多囉 不同牌子serum所養起來的細胞 外觀看不太出來
但Tx efficiency絕對有影響 以上只是小小心得 參考 參考
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