Re: [討論] 想請問PCR時遇到smear情況的原因
反正你就是增加特異性就對ㄌ
溫度加高 模板濃度 引子濃度都降低 這三個交叉使用 應該就OKㄌ
※ 引述《mournermind (阿矇)》之銘言:
: 我最近開始用toyobo的polymerase作PCR
: 設定如下
: 95度 10分
: 95度30秒
: 55度30秒
: 72度01分
: 30cycles
: 72度10分
: 我的target長度1Kbp
: template是細菌的genome 我抽出DNA後沒有稀釋直接取1micro
: 到100micro的反應系統裡
: 結果出現的都是亂七八糟的smear
: 我目前想到原因可能是template太濃 那還有其他原因可能smear嗎
: 像是TM太低之類的??
: 我有爬過文啦..可是沒得到想到的東西^^"
: 想問問有經驗的各位大人 ^^" 謝謝唷
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11/29 17:00, , 1F
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