Re: [求救] 請問detect protein trimer的方法
※ 引述《officium (officium)》之銘言：
: 如題 請問該如何做比較好呢
: 查了paper 有人就是induce protein變成trimer後直接跑SDS page
: 好奇怪阿這樣不會denature然後變成一條bend嗎?
: 還是說我的loading dye裡面就別加DTT之類的東西啦 @@??!
: 實驗室的人是告訴我跑netive gel
: 請問protein的帶電要多負跑netive gel才跑的下來? = =??!
: 以上 這兩種方法真的可以用嗎 那哪種比較好
: 請問還有別的方法嘛
: 還有大家是用哪套系統查online protocol的呀
: 感覺突然看到跑tri 腦袋空空都生不出來方法
: 謝啦謝啦 :)
整個覺得你不是很了解PAGE，
你該從NATIVE PAGE(不管是膠還是buffer類都不加SDS) 樣品也不加熱
基本上你分子量多大我不清楚，
最好設定running buffer pH>pI (通常8已經幾乎大過所有)
因為做低%PAGE，我會不作集膠~我實驗室做到4%膠，
(我家pentamoer蛋白質115kDa左右 由五個monomer組成)
理論上你三個帶電荷會比一個多
加上低%PAGE孔洞加大~分子量影響變小，電荷多的會跑比較快
還有SDS DTT功能 不一定只會denature一個功用
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◆ From: 163.23.211.175
※ 編輯: ng0529 來自: 163.23.211.175 (03/31 13:27)
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