Re: [問題] agar的培養基好難做 T_T
※ 引述《eliec (賣小孩的火柴女)》之銘言:
: 我是cell culture新手,
: 最近剛開始嘗試製作培養基,發現我沒辦法在凝結之前就把所有的動作做完,
: 除了同一片的厚度不一,有幾片培養基居然 " 上下層分離 "
: 我使用的下層是1% agar,上層是0.5% agar,
: 我準備的是一罐2%的膠以及2倍的medium,配好後都在43度的水浴槽,
: 要使用的時候在操作台裡薑兩者依照比例混合,並且放入well或dish裡,
: (通常是在放入dish這個動作會很黏....所以膠不平...)
: 用普通的agarose,並非低凝點的,難道真的要砸錢去買低凝點才能用嗎 T_T
: 請問有沒有前輩能提供一些操作的技巧?
2%的膠很容易凝固
如果只放在43度水浴槽 大概做幾個plate 就會開始變得稠稠的了
我做的時候 先將2%的gel (已滅菌) 用微波爐完全溶解
之後就拿到操作台裡面 直接依照比例加入medium (也就是推文說的鐵砂掌XD)
這樣加入dish的agar就會依然維持液狀的溫度 此時你就可以將它們均勻搖平
如果你擔心這樣會將medium的溫度變得過高
適當地調整原本stock的 agar 以及medium濃度
就可以不至於因為agar用的量太多 造成整體溫度過高了
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