IHC染色 脫水封片問題
各位好,第一次發文,如果有違反的地方還請麻煩糾正><
最近使用大鼠肺部的石蠟切片4um 染IHC stain
想請問各位最後都是如何脫水封片?
我們實驗室先前的protocol是寫
85%酒精3分>95%酒精3分>100%酒精3分*3>xylene5分*3>封片
但最近發現梯度酒精脫水之後有一個呈色劑會掉色, 顯微鏡下看signal都不見了(vector
的 fast red 有人也用過這個嗎?)
最近用100%3分*3發現好像就沒有掉色,但好像有脫水沒脫乾淨的感覺?
然後四處跟別人討論之後發現其他實驗室的IHC染色完後泡完xylene會先在hood內抽乾,
再封片!
但我們之前都是梯度酒精泡完再泡xylene擦乾玻片背面沒風乾就直接封片了...(學姐還
說不可
以讓玻片乾掉)
想請問一下大家在最後的步驟都是怎麼做的
若是我xylene完直接風乾會讓組織顏色變深嗎?(或是是否會影響hematoxylin的顏色)
另外風乾完會再浸泡xylene再封片嗎?我們實驗室的封片膠含有xylene!
再麻煩各位幫忙解答>< 感激不盡
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 42.77.112.96 (臺灣)
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