Re: [問題] 我的電泳結果沒有亮帶 - 步驟
你有沒有跑positive control?
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==> wulito.bbs@ptt.cc (考完悶的緊) 提到:
> 取菌液 1 c.c.
> 以 10000 xg 離心5分鐘
> 取沉澱 改加入 200ul 無菌水
> 煮沸 10mins 以 10000 xg 離心 5 mins
> 取上清液後
> 取 2ul 跑 PCR
> PCR 添加的藥劑
> template 2 ul
> primer 各 1 ul
> 混合溶液 10 ul 內含
> polymerase 1.25 U
> MgCl2 1.75 mM
> dNTP 200 uM
> buffer <---- 這個產品上面沒有寫含量或濃度
> 無菌水 36 ul
> 之後以 95度 5 mins 1 cycle
> 95度 30 sec
> 55度 1 mins
> 72度 30 sec 35 cycle
> 最後以 2% agarose 跑電泳
> 20 ml 的膠 以 5ul 的 ETBr 內染
> 如果有需要增補的地方
> 請各位大大告知 謝謝^^
--
Good actions require everyone's cooperation.
Let go of personal bias.
Give without expectatiion,and give with gratitude.
~Jing Si Aphorisms
--
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