Re: [請益] 自己表現的protein用來treat細胞
※ 引述《gidon (打球的幸福呢)》之銘言：
: ※ 引述《microball (研究院路的紫薇花)》之銘言：
: : 厄...你做出的蛋白有tag嗎？
: His-tag 有阿
: 可是有用過的人也知道HIS的純化程度對細胞而言是不夠的吧
: : 如果有的話可以用此純化，不然可能要用LC之類的純化？
: 我有想過用FPLC(因為分子較大不適合HPLC)
: 可是不太清楚利用FPLC純化出來的應該很純了
: 但是像是外面公司賣的cytokine他們純度是比這更純還是已經夠了?
HPLC也可以用在大分子啦...
你可以去看一些GPC的HPLC column...
如果你的分子量差異夠分開的話...
這是個不錯的選擇...
另外要高純度的話還可以考慮用Affinity Chromatography...
但你要先找出可以抓住你蛋白質的東西...
而且要可以接在gel上並且在一定條件下可以搶下你的protein的...
如果沒有...也可以考慮用IEC...或許也是個選擇...
: : 品質的話...可以用OD去算純化後的濃度
: : 純度的話...可以跑SDS gel
: 感謝大家的解惑
: 自己說一說怎麼覺得那我是不是應該打電話去問賣cytokine&growthfactor
: 的公司問他們他們怎麼做出來的@@"
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◆ From: 203.71.94.10
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