Re: [請益] 自己表現的protein用來treat細胞
※ 引述《gidon (打球的幸福呢)》之銘言：
: ※ 引述《microball (研究院路的紫薇花)》之銘言：
: : 厄...你做出的蛋白有tag嗎？
: His-tag 有阿
: 可是有用過的人也知道HIS的純化程度對細胞而言是不夠的吧
嗯嗯...如果你要狠一點的話(或是後來發現 LC的儀器有困難)
可以用 tandem tag 做純化
像是 Flag/His 或是 His/ V5之類的
先用His抓蛋白下來，再用 antibody 抓一次，應該就非常純了
基本上，無論做了多 high-quality 的純化
還是無法證明沒有雜質~~@@
所以在 control 組方面多做一些，也許會讓實驗更嚴謹
: : 如果有的話可以用此純化，不然可能要用LC之類的純化？
: 我有想過用FPLC(因為分子較大不適合HPLC)
: 可是不太清楚利用FPLC純化出來的應該很純了
: 但是像是外面公司賣的cytokine他們純度是比這更純還是已經夠了?
: : 品質的話...可以用OD去算純化後的濃度
: : 純度的話...可以跑SDS gel
: 感謝大家的解惑
: 自己說一說怎麼覺得那我是不是應該打電話去問賣cytokine&growthfactor
: 的公司問他們他們怎麼做出來的@@"
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~因為生活已經太複雜了
所以就讓我們的愛情單純吧~
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