Re: [問題]有關抽plasmid
看板Biology (生物學)作者Mouseking (叫我老鼠王....-_-)時間19年前 (2006/11/01 09:22)推噓0(0推 0噓 0→)留言0則, 0人參與討論串4/13 (看更多)
※ 引述《wangba (王八)》之銘言：
: ※ 引述《yearaaaa@kkcity.com.tw ( )》之銘言：
: : 在下最近在抽取plasmid
: : 但是礙於菌種copy number太低了
: : 以致於在做digest>elute後band就不見了
: : 請問高手們在plasmid copy number太低時
: : 你們會做哪些protocol shooting?
: 可以試試看在菌種養起來之後
: 再加入少量的kanamycin (2~5mg/L)
: 可以抑制細菌的生長
: 但是並不會抑制plasmid的生成
: 因此可以增加copy number
這招式真的嘛？可不可以提供學理文獻？真的沒聽過耶....
是所有菌種都可以嘛？還是哪些特殊的菌種？
如果copy number低的菌種，我想到的笨方法是養個1000ml 在去抽plasmid DNA
不然就把原來的plasmid DNA再transformation到high copy number 的菌種不就好了？
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