Re: [問題]有關抽plasmid
※ 引述《circleming.bbs@ptt.cc (新世紀音樂)》之銘言：
> ※ 引述《yearaaaa@kkcity.com.tw ( )》之銘言：
> : 在下最近在抽取plasmid
> : 但是礙於菌種copy number太低了
> : 以致於在做digest>elute後band就不見了
> : 請問高手們在plasmid copy number太低時
> : 你們會做哪些protocol shooting?
> 你是用什麼protocol...
> 有時候 kit 不一定好用～
> 我曾經用QUIGEN做midi-prep..
> 但是對某種low copy number的vector就效果不如預期～
> 因此我用傳統方法作～（傳統方法也有很多種...)
> 且加大culture volume...
> 至少達到我要的效果～
> 且純度也都OK～
> 先解釋清楚你用的是何種protocol才能troubleshooting阿～
我不是用KIT
用的是自製的solution 1.2.3
在酒精沉澱
就跟聖經書上的差不多
在抽完時跑膠有微弱的band
做完RE elute後
再跑膠就不見囉
如果照你說的加大體積的話
是用小體積分很多管在最後復溶時再混在一起比較好
還是要用large volume的protocol做比較好呢?(From molecular cloning protocol I)
一開始的方法也是從這出來的...
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