Re: [問題] 如何將蛋白質結合在一起
※ 引述《timbrian.bbs@ptt.cc (perk yourself up)》之銘言:
: 因為想研究一個蛋白質的某個domain 的 modification
: 如何影響到另一個domain 的活性
: 卻又不想使兩個domain 同時被 modify (兩個domain 都有modify 的位置)
: 而使用一般的chemical cross linker 會 nonspecific modification
: 其結合方式會不正確 結合方式與 native 的方式會不同
: 請問板上諸大
: 有沒有看過任何方法
: 可以將兩個不同的蛋白質接在一起
: 而非是經由 cloning 的方式
: 且接在一起的方式分別為兩個蛋白質的N端跟C端的結合
將domain A與fish的gene做fusion
將domain B與bait的gene做fusion
然後將domain A-fish的部分先做modofication
再將domain A-fish-M混在domain B-biat混和
觀察有M和沒M的結果是否有差異......
只是這樣透過一個中間物不知是否會對您的實驗需求有影響就是
看起來像yeast two hybrid XDDDDD
不然就...利用chemical reagent做partial modification吧
控制chemical的濃度、反應pH、buffer,etc...
印象中Cyanylation測disulfide bond的方式也是partial modification ^^"
(最近千面人很熱阿...XDDDD)
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以上純為打嘴炮,小弟我也沒做過 :DDD
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