Re: [問題] 請問大家 有關分離核質prorein的方法
※ 引述《spunka ()》之銘言:
: ※ 引述《dhaphy (八月九號 >"<)》之銘言:
: : 我目前研究的蛋白主要是在核中表現
: : 所以收lysate的方法需要分離核質
: : 想請問各位大大
: : 有沒有什麼好的經驗跟好的方法
: : 因為請教學姊 各有不同的方法
: : 可是最後都告訴我一句..."但有時候還是分不乾淨"
: : 哀...拜託大家了
: : 或者可否告訴我 該去哪邊查會有比較好的方法
: : 謝謝!
: 我同學是丟給我這一篇
: JBC
: Vol. 278, No. 43 41963–41969, 2003
: 他說他就是依照這個方法都有抽出來
: 大家試試看吧
: 不過我有一個問題
: 就是裡面用的portease inhibitor cocktail用的我不知道是哪種的
: 我看sigma賣的portease inhibitor cocktail就有五六種
: 抽細胞質和核的蛋白所用的cocktail有什麼不一樣嗎??
他用的protease inhibitor應是這三各
1 mM phenylmethylsulfonyl fluoride, 10 ug/ml aprotinin,
10 ug/ml leupeptin
phosphatase inhibitor則是NaF
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