Re: [問題] 如何能更有效率的取得神經細胞?

看板Biotech (生命科學)作者 (觀察者)時間19年前 (2006/08/02 13:12), 編輯推噓0(000)
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※ 引述《wadewang.bbs@bbs.badcow.com.tw (忙忙茫.....)》之銘言: : ※ 引述《LIAR.bbs@ptt.cc (墮天使)》之銘言: : : 今天我就取7天大wistar鼠的小腦,放入KERB後用剪刀剪碎,然後就加trpsin和DNAse, : : 25分鐘後加inhibitor,再25分鐘後離心,取上清液用45um過濾 : ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ : 這步驟有錯吧 : 我的protocal是去掉上清液 : 留下沈澱物再用medium打散耶 : 離心過細胞都沈澱了 : 上清液怎麼會有東西XD 囧,果然弄錯了,我一直想說要過濾,所以不清楚這個步驟要幹嘛,就取錯了。 不過我這次重做,卻發生一個奇怪的問題,我在離心後,發現細胞少的可憐,而且學長 的上清液是透明的,但我的上清液卻有絲狀懸浮,很像棉絮那樣,我離好幾次都一樣, 請問這又是什麼問題呢? 我這次只是在PIPETING時,用力抵住下方,然後歪一點點再用力來回沖,想用水壓沖更 散,其他步驟則是和上次一樣,請問這是就問題所在嗎? : : (要的細胞小於45u)然後再離心,去掉上清液在加培養液..... : : 問題是,之後數細胞時,根本沒細胞,之前第二次離心時,也沒看到沉澱。 : : 雖然我去上清液把細胞吸掉也有可能,但我覺得根本問題就是細胞太少,也就是一開始 : : 小腦切不夠細,所以想請問一下有沒有什麼好辦法可以讓腦可以容易分離成單細胞, : : 不用浪費太多小鼠就能取得足夠量神經細胞?我覺得用剪刀剪小腦實在不是好方法.... -- 太初有道,道與耶和華同在,道就是耶和華。這道太初與耶和華同在。 萬物乃藉祂所造,凡被造的沒有一樣不是藉著祂所造的。生命在祂裡頭, 這生命就是人的光。光照在黑暗裡,黑暗卻不接受光。 吾輩乃生於黑暗,行於黑暗。因神之指引,行向光明;又因撒旦誘惑,回歸黑暗。 我不斷地徘徊於光明與黑暗之間,從被造之日至今,又自今直到那審判之日的來臨。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.137.72
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