Re: [問題] 如何能更有效率的取得神經細胞?
※ 引述《LIAR.bbs@ptt.cc (墮天使)》之銘言:
: 今天我就取7天大wistar鼠的小腦,放入KERB後用剪刀剪碎,然後就加trpsin和DNAse,
: 25分鐘後加inhibitor,再25分鐘後離心,取上清液用45um過濾
^^^^^^^^^^^^^^^^^^^
這步驟有錯吧
我的protocal是去掉上清液
留下沈澱物再用medium打散耶
離心過細胞都沈澱了
上清液怎麼會有東西XD
: (要的細胞小於45u)然後再離心,去掉上清液在加培養液.....
: 問題是,之後數細胞時,根本沒細胞,之前第二次離心時,也沒看到沉澱。
: 雖然我去上清液把細胞吸掉也有可能,但我覺得根本問題就是細胞太少,也就是一開始
: 小腦切不夠細,所以想請問一下有沒有什麼好辦法可以讓腦可以容易分離成單細胞,
: 不用浪費太多小鼠就能取得足夠量神經細胞?我覺得用剪刀剪小腦實在不是好方法....
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07/25 09:33, , 1F
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