Re: [問題] 蛋白質表現的問題
※ 引述《smallsum (天空)》之銘言:
: 我在蛋白質表現時
: 使用double digest切我片段及vector
: DNA定序回來時
: 我的序列也是完全正確的
: 但在VECTOR上的His tag序列卻消失了
: 但在使用IPTG誘導時
: 也能誘導出我的蛋白質
: 可是卻無法使His tag的column
: 我使用的Vector為pET28b
: 酵素為NdeI及ExoRI
: 請各位高手幫我回答一下吧
28b應該是前後都有His tag
你是如何判斷His-tag不見了?是抓不住的關係嗎?
抓不住通常是Hsi-tag被擋到的關係
不太可能消失
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