Re: [問題] 蛋白質表現的問題
※ 引述《aggaci (Desperado)》之銘言：
: ※ 引述《smallsum (天空)》之銘言：
: : 我在蛋白質表現時
: : 使用double digest切我片段及vector
: : DNA定序回來時
: : 我的序列也是完全正確的
: : 但在VECTOR上的His tag序列卻消失了
: : 但在使用IPTG誘導時
: : 也能誘導出我的蛋白質
: : 可是卻無法使His tag的column
: : 我使用的Vector為pET28b
: : 酵素為NdeI及ExoRI
: : 請各位高手幫我回答一下吧
: 28b應該是前後都有His tag
: 你是如何判斷His-tag不見了?是抓不住的關係嗎?
: 抓不住通常是Hsi-tag被擋到的關係
: 不太可能消失
我是經由定序回來會發現His tag序列都不見了
但我能原本的pET 28b直接去定序
都能找到His tag的序列
所以才會覺得很奇怪
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◆ From: 140.121.170.46
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