Re: [問題] Real-time PCR
若是酒精受影響.....有沒有辦法除了重抽以外...
針對轉好的cDNA做補救??
可是我覺得應該不太可能是酒精影響ㄟ...
因為我抽RNA是用kit,不是用trizol....
而我每次加完wash buffer,都有2次離心...
所以我覺得問題不在這...
可是我還是想問rek或有其它大大...
針對轉好的cDNA要如何做補救??
※ 引述《lakerjackt (NN )》之銘言：
: 這我知道阿...但酒精真的有影響到我的cDNA...
: 應該連PCR都做不太出來阿!!!
: 其實我是在猜機器或試劑有問題....
: 反正我現在頭大了阿!!...
: red大是建議我把cDNA再通一次column..把酒精洗淨嗎?
: ※ 引述《redhawk ( )》之銘言：
: : 基本上,的確是PCR做的出來的,q-PCR也應該要看到結果
: : cDNA的純度真的很重要, 不只是在轉cDNA的過程
: : 先前準備RNA的步驟也有很大的影響
: : 尤其是處理酒精的步驟, 不夠乾淨俐落的話, 是會影響深遠的^^"
: : 另外, 不知道你轉cDNA是用OligodT或是random hexmer呢?
: : 這個對你要看的是什麼基因也會有影響
: : 不過目前我覺得酒精去除的不夠乾淨應該是主要原因之一
: : 你可能需要重新Isolate一次會比較好
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◆ From: 218.169.117.86
※ 編輯: lakerjackt 來自: 218.169.117.86 (12/16 16:48)
※ 編輯: lakerjackt 來自: 218.169.117.86 (12/16 17:31)
※ 編輯: lakerjackt 來自: 218.169.117.86 (12/16 17:31)
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