[問題] Real-time PCR
有人用過從血液中抽出的cDNA做real-time PCR嗎?
因為本身是用ABI的機器run real-time PCR...
但一直try不好PCR的condition...
不然就是有出來後...再做一次就沒出來了...
且Ct值一值都滿後面的...40上下...
所以一直做到沒信心...><
所以我想請問各位real-time PCR幾個問題..以解笨小弟我的疑惑..
1.real-time PCR做的時候,反應的量一定要加的很精準嗎???
2.ABI的real-time PCR是不是都不用設定annealing..這樣一定都做的出來喔??
3.因為我是用kit抽RNA,但是是用一般方法轉cDNA..所以會有可能cDNA轉的不好嗎?
4.請問有人用invitrogen這家的kit抽RNA嗎?...做後續效果都可做很漂亮嗎??
5.請高手幫我想一下我該怎麼辦...謝謝...
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※ 編輯: lakerjackt 來自: 218.169.113.7 (12/07 21:16)
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