[求救] 細胞培養
大家好 !!!
我目前的實驗使用的細胞是大鼠主動脈平滑肌細胞株「A 10」
以 10% FBS 的 DMEM 培養
基本上就是給藥，再以Western blot定量某蛋白質的表現
同一個實驗條件下，我會一次收足2個n值，一次跑兩片膠
但是常常壓片出來的結果都不一致，再現性非常的糟糕
明明給藥時間一樣，同時間subculture，同時間收細胞，同時定量蛋白質總量
請問這種變異性很大的問題，應該不會常出現在cell line吧...
聽說只有primary culture很不穩定 -.-|||
是不是在收細胞之前一定要計數細胞嗎？
可是既然已經定量蛋白質，每個well下的蛋白質總量都一樣
這樣有必要計數細胞嗎？
因為我們的實驗室老師快退休了，幾乎都沒學長姊可以問 orz
先感謝回答問題的板友 !!!
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