Re: [求救]有關DNA電泳的問題(以爬文)
看板Biotech (生命科學)作者lovenainai (lovenainai)時間17年前 (2009/03/09 21:36)推噓0(0推 0噓 0→)留言0則, 0人參與討論串3/3 (看更多)
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: 1. 你抽的是甚麼DNA? genomic DNA? Plasmid? 預期大小是多大?
: 2. 你放了多少 ug DNA 下去跑膠?
: 3. 品質好的 DNA 吸光值在 260/280 ratio = 1.6-1.8
: 吸光值基本上僅供參考用
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: ◆ From: 140.122.46.214
: 推 zxcvbnm1655:gDNA 我放了5ul dna+1ul dye 260/280都在1.2左右 03/09 12:27
: → zxcvbnm1655:品質沒有很好 但是不會什麼都沒有吧 好怪喔 03/09 12:28
: 推 sGoat:樓上你抽DNA的方法有問題,marker有出來就不會是膠的問題 03/09 16:54
: → sGoat:260/280 1.2請重做,這種數值有相當大的問題是沒抽出來 03/09 16:55
如 sGoat 所說 1.2 請重抽
比較簡單的方法是用 phenol/chloroform 再去蛋白一次然後再去測 OD
如果還是不行 就重新來一次吧~
然後還有一個問題是 gDNA 基本上你抽出來在 marker 的範圍內甚麼也看不到
頂多就是頂端有一團霧狀
通常不會有人拿 genomic DNA 來跑膠 因為沒有太大意義
不管你接下來要 PCR 或是 cloning 都好
都是做完為了要 check 已知/預期 size 的 DNA 片段才會去跑 gel
如果你只是想知道 DNA 品質 通常測個 260/280 有在範圍內(1.6~1.8)就夠了
另外
想知道放多少 DNA 應該是 ug 而非 uL
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