[求救] 有人試過用agar包住細胞後,再進行石蠟切片嗎?
各位板友好:
小弟目前進行的實驗是將一群細胞以suspension culture的方式培養之後,該群細胞會形
成sphere,但由於數量不多,所以想利用切片的方式以求可以多染一些marker
在diabetologia, 2000, Vol.43, 907-914這篇paper裡,看到他們可以利用agarose gel
固定細胞之後,再進行石蠟包埋切片等等實驗
我也曾經試過這種方式,但是遇到一些問題:
1.我自己試著以酒精對細胞進行脫水,分別為70%,80%,90%,100% EtOH於37度水浴槽
各半小時,接下來再加入xylene之後,我就看不到pellet,根據旁人的說法,
細胞若遇到xylene會變透明,不知道這樣的說法是否有人有經驗ꄊ
2.接下來要加入液狀石蠟(約60度)將xylene置換掉,但石蠟溶液本身較稠
故細胞應該不容易沈降到底部,不知道在這邊該如何更換
3.最後就是石蠟跟ararose gel的熔點問題,因為我們這邊的石蠟大約在60度左右,
所以擔心在這樣長的時間中泡在石蠟溶液裡,agarose gel會不會熔光光,
那有什麼建議可以降低細胞的lose
希望曾經做過類似實驗的板友,可以不吝分享您的經驗,再此先謝過了
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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