[問題] western blotting

看板Biotech (生命科學)作者 (wind)時間19年前 (2006/09/22 08:35), 編輯推噓5(501)
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最近一直在做western 但一直無法找到我要的蛋白 每次顯影出來都是非常空白的一張底片 我要找的蛋白是p*-Akt 我不知道在哪個步驟錯了 希望版上的各位大大能幫我找出問題所在 以下是我做western 較關鍵的步驟 blocking buffer是5%的脫脂奶粉 作用1小時 一抗是用TBST配(1:1000) overnight 4度 二抗是用TBST+2.5%的脫脂奶粉配置而成 作用2小時 washing buffer是TBST -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.129.65.50

09/22 09:00, , 1F
sample?
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09/22 09:03, , 2F
positive control ?
09/22 09:03, 2F

09/22 13:07, , 3F
sample是人類T細胞,沒有做任何處理,單純測細胞內的p*-Ak
09/22 13:07, 3F

09/22 13:08, , 4F
P*-Akt表現
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09/22 19:42, , 5F
有沒加phosphotase inhibitor?
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09/24 13:09, , 6F
有加phosphotase inhibitor
09/24 13:09, 6F
文章代碼(AID): #154o_UsB (Biotech)
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