[問題] western blotting

看板Biotech (生命科學)作者時間18年前 (2007/08/30 11:56), 編輯推噓5(500)
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想請問一下 我最近western blot 的時候 常常會出現membrane 在加完ECL 後 整片發螢光的現象 導致之後壓片結果是片子ㄧ片黑 (形狀就是membrane 的形狀) 可是我之前依照相同的實驗條件跟藥品 實驗都不會這樣 (例如:前ㄧ天做都正常 隔ㄧ天就整片黑) 想請問是什麼原因可能會照成這樣的結果 謝謝大家 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.109.90.199

08/30 12:15, , 1F
有可能是二抗wash不乾淨或底片本身曝光過.參考看看囉^^
08/30 12:15, 1F

08/30 12:39, , 2F
在暗房中就看到整片發螢光的現象,有可能是Wash的問題喔~
08/30 12:39, 2F

08/30 16:07, , 3F
有可能沒block好,1抗.2抗皆粘到membrane上,so............
08/30 16:07, 3F

08/31 17:47, , 4F
應該是blocking的問題 你的blocking是? milk? reused BSA?
08/31 17:47, 4F

09/03 15:35, , 5F
2抗濃度太高、blocking濃度不夠,wash不乾淨^^
09/03 15:35, 5F
文章代碼(AID): #16rZ_R4g (Biotech)
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