Re: [求救] real-time pcr的問題
※ 引述《latte366 ( )》之銘言:
: ※ 引述《AS1 (AS1)》之銘言:
: : 現在的問題是這台機器跟我沒關係
: : 因為要是我的話 我絕對不會買
: : 但問題是現在買了
: 個人淺見:
: 再下覺得最大的問題不是機器
: 而是閣下的心態
: 如果所有生技人非用過的機器不做
: 或者有實驗做不出來就怪當初為何要購買
: 那台灣的生技業就真的只是如此而已
: 就您所說 對方specilist來上第二次課的時候您已接手這份工作
: 那不是就該虛心求教 為何會躲得遠遠的 連聽都不想聽呢
: 況且操作手冊您也是有 居然會連翻都不想翻!?
: 就您前文的敘訴 您真的了解melting curve 的意義是什麼嗎
: 如果原理都沒搞懂 就想上機 出了問題才來怪公司為何要買妳不會用的機器
: 那我會嚴重懷疑閣下公司的人事遣派制度有無問題
: 當初面事時有無雙方溝通好工作內容
: 方便透露一下公司嗎 地雷別讓後面的人也踩到
: : 130萬的機器 跑不出要的產物
: : RT-PCR產物可能再兩百多 結果去跑REAL-TIME PCR 結果都變成三百以上 甚至更高
: : 不然就是沒有BAND
: : 關於羅氏的售後服務
: : 我們幾乎每周打電話過去(每週三通以上) 就是要她們來上機試做看看
: : 結果都要三催四請
: : 現在直接跳過技術專員 直接打給經理
: : 因為技術專員時間很難等
: 我做過ABI 也做過Roche的儀器
: 個人覺得 ABI的售後服務的確是很棒!
: 但是Roche的也沒像閣下說的那麼差
: 請問距離上次閣下請他們來上機 到現在隔多久呢?
: Roche不是只有貴公司一家客戶
: 講一句較不中聽的話
: 研究設備 動輒3、4百萬以上的儀器比比皆是
: 不是買了個130萬的儀器就可以等人來做好自己份內該會的事了
: 套句星爺的話 "實驗,不是這樣做的"
: 個人建議您先將實驗原理 儀器操作步驟弄懂
: 以及格下檢體的前處理步驟弄清楚有無問題
: 包括RNA的萃取、RNA 260/280 ratio、RT的步驟、tranditional PCR、電泳
: reagent有無汙染...etc
: 實驗是一環扣一環的
: 在下雖然沒有這裡前輩豐富的實驗經驗及理論背景
: 不過還是私以為實驗往往最大的問題不是來自機器
: 而是操作這些實驗的人的步驟
: 而且troble shooting
: 本來就是該從自己能解決且最有可能的地方先做起
: 難不成閣下真的有把握換了台儀器結果就一定很漂亮的出來??
: : 前面說到要很純的樣本 羅氏會不知道我們需要的目的嗎
: : 賣機器的不會問對方需要什麼嗎 就直接賣嗎
: 很純的樣本不是問題
: 難到隨便拿個ㄚ哩布達的東西跑得出來您會很高興?
: 假設是抽RNA 純度當然是越純越好ㄚ
: 這跟對方需不需要知道您的目的是兩碼子事
: 您的實驗要用到什麼樣的儀器
: 本來就是自己該要先做功課 再去和廠商做洽詢
: : 這台機器買的人 不是我 以前學校有 但是在養蚊子
: 別一直強調買的人不是您
: 我猜您的實驗室 有90%以上買的東西不是您
: 那您的學校還真有錢
: 可惜了那台儀器
: 如果是Roche的lightcycler那台真的不錯用
就是這一台 跑PCR的管子像毛細管那樣
我寧可用之前實驗室那樣 就直接是八連排的小離心管
請問有那各檢驗單位的報告是以REAL-TIME PCR做報告發出去
我請課長帶隊去學
否則 我還是只相信RT-PCR 或 PCR
快多少 要不要抽RNA 要不要做cDNA 整體而言 浪費金錢和時間 快沒兩各小時
: 操作得當 可為您省下不少寶貴時間
: : 如果說要很純的樣本 羅氏幹麻要我們買
: : 他有英文的說明書 但我連看都不想看
: : 之前上面的要我做 我都一直推掉 現在換學姊做
: : (因為有碰過那台機器只有我跟她 機器在她進公司之後買
: : 在我進公司之前買 要是我一定阻止下來 )
: : 我不做是因為我不會做 她們來上課 我學校還沒畢業 也都還沒進入那家公司
: : 一年做不到兩百各檢體 不知道為什麼要買那台機器
: 這裡不綴訴 上面提過了
: 請您心態要調整一下
: : 有本事賣 就要有本事建立環境給人家不是嗎
: : 這台機器採購 我還沒進公司
: : 真正做的都是底下的 有權購買的人 通常都是給意見 但不是第一線人員
: 還是那句話 請別強調機器買時您還沒進公司
: 現在的日本人也會說南京大屠殺時他還沒出生ㄚ.....(什麼跟什麼 這是廢話!)
: : 如果有人可以來台南幫我們做
: : 我們願意給車馬費 而不是像羅氏的人 你應該怎麼怎麼做
: : 對不起 都試了 做不出來
: 您不妨把您試過的條件 過程寫清楚
: 說不定有些部分是您沒注意到
: 我想板上很多有經驗的前輩會不吝給您指教
: 至於想要請人代做 雖然那也不失一個方法
: 不過我只能說..
: 實驗還是您自己的 盡可能得靠自己去完成他會有很大的成就感
: 現在有這個版面是讓大家線上討論
: 如果真有那麼好心的人 願意幫忙人代做實驗
: 我想我會很想發給他一張卡........(您真是個大好人ㄚ~~~~~~~)
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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