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[討論] 存菌? 凍菌?

看板Biotech (生命科學)作者時間17年前 (2009/02/26 19:57), 編輯推噓6(6推 0噓 6→)
留言12則, 6人參與, 7年前最新討論串1/8 (看更多)
因為最近開始做細菌的實驗 但實驗室的背景並沒有太多養細菌的protocol 所以想請問一下 為什麼我們實驗室裡會有一些在常溫下存放 有裝著agar和菌的小管呢? 並且其年限已經不可考 我以為存菌必須加入15% glycerol 混勻後置入-80度的冰箱 但不曉得為什麼會有這種菌株的存放方式 所以想請教各位 另外也想問問 如果要從-80度裡取出之前存的菌回來養 應該怎麼樣解凍比較好 我現在用的方法是-20放置1 hr, 冰箱上層放置1 hr 下層放置1 hr 然後才加100ul 進入新的LB medium(15~20ml) 不過覺得長得很慢很慢 所以這個地方有沒有什麼改善的空間呢? 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.133.91
推
02/26 20:08, , 1F
囧 我都直接全下到新的LB裡就好了 100會不會太少
02/26 20:08, 1F
推
02/26 20:12, , 2F
用養菌管養約8ML左右 O/N通常就長得很好
02/26 20:12, 2F
→
02/26 20:13, , 3F
看你的菌株是什麼條件吧？
02/26 20:13, 3F
請問你是怎麼全下的? 有溶解嗎 或是直接挖冰進去呢??
推
02/26 20:37, , 4F
可以先劃到新的LB plate, 再從其中挑來養菌液.
02/26 20:37, 4F
推
02/26 21:32, , 5F
趕時間就會從凍菌取大概10ul到5ml LB中,O/N就長得很多了
02/26 21:32, 5F
但O/N 這樣應該就報表了 也不是最健康的時刻 那我後續的實驗是為了要測其對抗生素的耐受性 如此一來就沒有好結果了吧!?
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02/26 21:32, , 6F
不趕時間可以塗盤再挑菌去轉小量
02/26 21:32, 6F
因為塗盤只能挑出某隻菌 但我的存菌管裡存的不只一種菌而已耶...
推
02/27 00:04, , 7F
會有含agar的小管通常是購買或是寄送菌種的保存方式
02/27 00:04, 7F
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02/27 00:05, , 8F
作好要冰的菌液態氮冷凍後直接丟-80即可,菌沒那麼容易死
02/27 00:05, 8F
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02/27 00:07, , 9F
要取出使用,拿tip或牙簽劃一下冰塊不用解凍,直接塗盤挑單株
02/27 00:07, 9F
唔 同上 我沒辦法只挑單株 有沒有更好的方法呢?? 還是謝謝各位^^ ※ 編輯: ararthur 來自: 118.167.30.61 (02/27 01:34)
推
02/27 12:00, , 10F
為什麼不挑單株？這種情況很少見
02/27 12:00, 10F
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11/11 01:19, , 11F
趕時間就會從凍菌取大概 https://daxiv.com
11/11 01:19, 11F
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01/03 16:51, 7年前 , 12F
要取出使用,拿tip或 https://noxiv.com
01/03 16:51, 12F
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